设备
CryoEM核心设施的核心部件包括一个200 Kv Thermo Fisher Scientific Talos Arctica G3 TEM和Gatan K3直接电子探测器:
赛默费雪科学塔洛斯北极G3
- 200kv透射电子显微镜。
- Schottkey排放国。
- 双聚光镜系统。
- 恒功率c -双物镜,Cs = 2.7 mm。
- 自动装弹机可以装12发子弹。
- Ceta 4096 x 4096像素CMSO CCD。
- Gatan K3 5,760 x 4,092像素直接电子探测器。
- 使用SerialEM的自动数据收集。
- 能够获得接近原子分辨率的单粒子低温电子显微镜。以Apoferritin样品2.0 Å分辨率为基准,基于FSC=1.34。
- 常规用于筛选冷冻栅格和单粒子冷冻em数据收集。
- 可以在iLAB上预约吗https://uncch.ilab.agilent.com/
Vitrobot Mark IV
用于快速浸入液体乙烷中制备低温格栅。
位于葛兰素研究大楼011室从塔洛斯北极大厅对面。
一般使用M-F 9 AM-7 PM。如果您喜欢在下班时间或周末使用Vitrobot,请与核心主任联系。
如果你想学习如何准备自己的低温网格:
- 设置iLAB帐户有准确的账单信息。
- 读CryoEM101-第1章样品制备和第2章CryoEM网格制备。
- 看Grant Jensen CryoEM课程-第二单元样品制备
- 读UNC CryoEMVitrobot协议.
- 联系核心主管并要求安排一次培训.
- 一旦核心导演感觉你有能力操作Vitrobot,你将能够在没有监督和小时后使用它。
可以使用iLab进行预约。https://uncch.ilab.agilent.com
Pelco easiGlow
通过辉光放电(用空气清洗等离子体)使透射电镜栅格亲水。
位于显微镜控制室大厅对面的低温预冻室。
Tergeo-EM等离子体清洁
等离子体清洗机能够从氩气和氧气中产生间接或直接的等离子体。用于渲染UltrAufoil和Quantifiol TEM网格亲水。