严格和再现性
北卡罗来纳大学生物分子研究中严格和可重复实验的八个步骤
- 如果使用核心设施,咨询与核心人员在规划阶段。如果您需要帮助开发功率分析,请咨询统计学家,以确保您的结果将得到充分支持。
- 设计你的实验足够的控制(严格)和复制(再现性)。
- 确保你所有的试剂(抗体,细胞系,小鼠)都是充分验证(见下文)。
- 有一个清晰的详细protoco(SOP)和数据分析计划。确保协议被严格遵守或任何偏差都有良好的文件记录。
- 确保进行实验的工作人员或学生训练有素理解每个步骤以及精确执行它们的重要性。
- 只使用良好的仪表,最好由专家人员在核心设施中维护和操作(见上文第1条)。
- 记录所有的步骤、实验中使用的试剂、设备和数据分析方法。确保文档和数据本身都正确地存储在一个安全的数据管理存储库中。
- 承认癌症中心资助基金(P30 CA016086)(如适用)、核心人员(姓名)、出版物核心人员。
生物化学和生物物理学系生物分子核磁共振(NMR)核心实验室的严格性和再现性指南
- 在规划阶段与核心工作人员协商。-斯图尔特·帕纳姆博士主任stitch.unc.edu,(919) 966 - 6184。
- NMR样品制备sop可以在这里访问,如果您的样品在使用仪器之前超出了这些指南,请咨询NMR核心主任。
- 所有新用户必须参加生物分子核磁共振主任的培训课程,才能访问核心设施及其仪器。
更多关于样品制备和更常见的核磁共振实验和应用的细节,请滚动到本页底部访问我们的sop。
所有核磁共振光谱仪的仪器校准标准
温度校准:
100%甲醇-d4, 40毫米灌装高度。
垫片地图:
2 mM蔗糖,0.5 mM DSS, 2 mM NaN3., 10% D2H O, 90%2O和40毫米填充高度。
脉冲校准:
0.1米15N-Urea, 0.113C - CH3.OH在100% DMSO-d6, 40毫米填充高度。
48.5 mM TPP在100%丙酮-d631P -灵敏度,40毫米填充高度。
α, α, α- f3.cc6H5在100% C6D6为19灵敏度,40毫米填充高度。
0.8毫米13C15N - GB-1n 20mm PO4, 100mm NaCl, pH 6.5, 0.01% NaN3., 10% D2H O, 90%2O和一个40毫米填充高度。
线:
0.3% CHCl3.在100%丙酮-d6, 40毫米填充高度。
信号噪声:
0.1%乙苯在100% CDCl中3., 40毫米灌装高度。